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超微结构与电镜 作业答案 [复制链接]

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只看楼主 倒序阅读 使用道具 0楼 发表于: 2009-04-06
1、    继续增加光镜的放大倍数的意义是什么?为什么?
    答:没有意义。由于光的波长的限制以及光的衍射的存在等原因,使得光镜的图像分辨率极限不可能小于200nm,也就是说不管在怎么增加光镜的放大倍数,也不能提高其分辨本领,这样的放大是空放大,没有任何意义。
2、    在TEM中,透射电子如何成像?
答:TEM利用透射电子(直接透射电子、弹性透射电子、非弹性透射电子),采用泛光式作用方式,获得薄样品内部结构的透射电子显微图像。能用TEM观察的样品应该具有“质量厚度反差”,这样,当入射电子束照射到样品时,质量厚度高的样品结构发生散射的几率高,强度大,散射角大,物镜光阑拦截吸收掉偏转角大的散射电子,仅允许直接透射电子和部分偏转角小的散射电子进入成像系统。所以,对于质量厚度高的结构,进入成像系统的电子少,以少量电子激发荧光屏,屏显得较暗,反之,对应质量厚度低的结构,进入成像系统的电子就多,以较多的电子激发荧光屏,屏则是亮的。这样,终屏上就有了亮暗反差,透射电子显微图像就可以被视觉感知了。
3、    在SEM中,二次电子如何成像?
答:SEM利用二次电子(X光光子,俄偈电子、反射电子)作信号,采取扫描式作用方式,得到薄膜或块状生物样品表面形貌的二次电子显微图像。SEM镜筒中入射电子束在样品视场内逐点逐行的扫描,激发出二次电子。二次电子信号探测器把收集到的信号通过一系列光电变换及放大加工处理后,控制显像管的亮度。产生二次电子多的样品像元对应着的荧光屏像素是亮的,反之,则是暗的。这样,生物样品的表面形貌的二次电子显微像就显示在观察和记录荧光屏上。
4、TEM超薄切片样品取材时,为什么要快、准、小、轻、低温?
答:快,是为了保持样品的微细结构,使其最大限度的近于生活状态,避免出现细胞自溶。准,是为了保证获得需要的组织。轻,是为了防止组织结构的人为损伤性变化。小,是为了适应固定液的穿透能力,获得更好的固定样品。低温,是为了降低细胞自溶酶的活性,防止细胞自溶。
5、SEM生物样品取材时应该注意哪些问题,为什么?
答:①SEM观察的生物样品,一般是组织或细胞的自然表面,所以取材时要确认取材的部位,避免误取。②为了使被观察的样品更接近于生理状态,取材要迅速,所用的刀片要锋利,操作要轻巧敏捷,严防对样品造成牵、拉、挤、压等损伤③为了提高固定、干燥、脱水及镀膜的效果,在满足所需观察内容的条件下,样品块以尽量取小一些为宜。
6、TEM负染色、TEM细胞化学、免疫电镜、冷冻蚀刻技术的基本原理,举例说明各用于哪些结构的观察。
答:TEM负染色是利用重金属盐包埋低电子密度的样品,使样品四周的电子密度加强,而样品本身则在黑暗的背景下呈现明亮的结构。负染色技术可用于显示大分子、细菌、病毒、原生动物、噬菌体、亚细胞碎片、分离的细胞器、核酸大分子、蛋白质晶体及其他大分子材料的超微结构。
TEM细胞化学主要是研究细胞内各种成分在超微结构水平上的分布情况以及这些成分在细胞活动中的动态变化,以阐明细胞的化学和生化功能。常用方法是电镜酶细胞化学技术,其原理是:细胞内酶存在于特定的部位。在一定反应条件下,使细胞内的酶与底物发生特异性反应,最终在酶的活性部位上产生一种不溶性的电子致密沉淀物,用电镜即可观察辨别确定该种酶在细胞超微结构中所存在的部位。此技术可用于溶酶体、微粒体等结构的观察。
冷冻蚀刻技术也叫冷冻复型技术。就是将样品冷冻固定后于高真空低温条件下使材料断裂,再在其断裂面上以一定角度蒸发一层极薄的铂和一层碳,形成铂-碳复型,最后将此复型清洗干净后于电镜下观察。此技术可用于观察诸如膜蛋白、核膜孔和细胞连接装置的形态、分布及密度等。
免疫电镜技术利用酶标抗体技术、胶体金标记技术、蛋白-A-铁蛋白标记技术等多种技术方法,在细胞超微结构水平上研究抗原抗体反应,进行抗原的超微水平定性、鉴别和定位。可用于观察病毒感染的细胞等。
7、区别细胞膜病理损伤和人工损伤的方法。
答:当细胞出现病理损伤时,膜上会出现大小不一、多少不等的破孔和缺损,可见线性膜性结构中断,失去连续性,或在破损处出现大小不等的囊泡,或在膜破损处附近出现嗜锇性很强的髓鞘图像结构。当细胞膜的破损是病理损伤时,除上诉现象外常伴有细胞器的病理变化,尤其是线粒体在形态、结构上的改变。如为切片制作过程中的人工损伤,常不能引起细胞器的病理变化,只存在细胞膜的破损。
8、内质网和高尔基复合体的常见超微结构变化。
答:内质网的超微结构变化包括:一内质网数量的改变:①为满足生理需求而出现的内质网数量的增多,体积增大。②在一些刺激,如药物、致癌剂作用下,出现内质网数量的减少或内质网的增生。二内质网形态结构的变化:①内质网的扩张及囊泡化。②粗面内质网的脱颗粒及解聚。③核糖体板层复合体的出现,板层间夹以核糖体,复合体中心可有线粒体、内质网、溶酶体及脂质等。④形成同心性板层状小体。小体中心常有线粒体、脂滴及溶酶体。⑤随细胞形态的改变出现各形态。⑥粗面内质网扁囊壁内凹时,有其他细胞器及包涵物随同凹入,形成池内隔离。⑦形成对合扁囊。⑧形成微小管网状复合体。⑨形成面内质网内杆状直微管。三内质网腔内出现包涵物,如脂质、糖原、蛋白质等。四在细胞周期的不同时相中,内质网呈现动态变化,开始直径较粗,在胞质中的分布较稀疏,之后渐渐变为直径较细、分布较致密、连续成网状的结构。
高尔基复合体的超微结构改变包括:一肥大或萎缩。高尔基复合体可因功能亢进而肥大,在中毒或病理情况下,高尔基复合体也可以发生萎缩、破坏或消失。二在某些情况下,高尔基复合体的位置可发生改变。如甲状腺滤泡分泌的旺盛时期,高尔基复合体可由细胞核顶部迁移至细胞的底部。三在中毒、高尔基复合体功能障碍等情况下,高尔基复合体的内容物会发生改变。
9、总结“溶酶体系统”所涉及的亚细胞结构。
答:溶酶体酶及膜的形成与内质网、高尔基复合体、内体密切相关。异噬溶酶体的形成又与胞膜的内吞作用相关。自噬溶酶体是溶酶体和自噬体融合而成,内含线粒体、高尔基复合体、糖原颗粒、脂滴等。所以“溶酶体系统”涉及的亚细胞结构包括:内质网、高尔基复合体、内体、胞膜、初级溶酶体、自噬溶酶体、异噬溶酶体及残余小体等。
10、识别大鼠微体的依据。
答:实验动物,如大鼠等微体中含有尿酸氧化酶,在电镜下形成高电子密度的颗粒状或结晶状核心,居中央或居边缘,称核样体或类核体。人和鸟类的微体中不含尿酸氧化酶,所以核样体可以作为识别大鼠微体的依据。
11、Mi的变化主要在哪四个方面?
答:①线粒体数目的增多或减少②线粒体大小的改变,出现巨大线粒体③线粒体形状结构的改变,髓样变、空泡样变、嵴断裂、内部出现包涵物等④电子密度的改变,出现线粒体固缩,或在长寿命细胞的凋亡细胞中出现低电子密度的形态、大小、结构完整的线粒体。
12、简单总结细胞核的结构和常见超微结构变化。
答:细胞核的结构:细胞由双层核膜包绕,外膜与内膜之间为核周池。核周池通过外膜与粗面内质网相连。核膜上有核孔及核孔复合体。核纤层一边与内膜相连,并与核孔复合体紧密连接,另一边则与染色质紧密连接。核内有核仁、核小体。核的骨架结构与核纤层与胞质的骨架结构相连。
常见超微结构变化:①增生活跃的细胞,如干细胞、恶性肿瘤细胞等核体积较正常细胞都有所增大②细胞核形往往伴随整个细胞的变化而产生变化,如中性粒细胞逐渐成熟老化时,细胞核呈现出分节或分叶状在恶性肿瘤细胞中,更可见细胞核形变得十分怪异,如呈辐射分叶状皱褶,形成核袋、核突、核裂等③核膜的变化包括核孔、核孔复合体密度的改变,核膜外突,核周池扩张,核膜出芽,环板层的出现,核膜增生等④随细胞周期时相变化,染色质会出现集缩和解集缩的动态过程。在一些病理状态下还可见染色质边集、染色质周颗粒、染色质边颗粒。在细胞死亡的过程中可见核浓缩、核碎裂、 核溶解⑤蛋白质合成机能旺盛的细胞可见核仁体积增大、核仁边集,蛋白质合成功能低下的细胞则可见核仁体积缩小。在一些病理条件下可见核仁分离,严重的核仁分离将导致核仁裂解。在肿瘤细胞和增殖明显的细胞中可见各种畸形核,如致密纤维环状排列核仁等。在早期的人子宫内膜腺上皮细胞核中,核仁呈管道状,称为核仁管道系统⑥核内有时可见包含物。有些为假包含物,如核内出现线粒体、内质网等结构。有些为真包含物,如糖原、脂质、Russell小体、同心性板层包含物、管道状包含物、管状细丝包含物、核内病毒包含物等。
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me_sy 鲜花 +1 好东西!!! 2009-04-06
always 鲜花 +1 2009-04-06
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离线muru
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只看该作者 1楼 发表于: 2009-04-06
整理得很辛苦,本来想出售的…… 5555
觉得好的请送花,急需鲜花!!!!
离线xxkk
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只看该作者 2楼 发表于: 2009-04-06
谢啦谢啦!
离线me_sy
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只看该作者 3楼 发表于: 2009-04-08
好东西!
我要有花肯定送啊。。。
离线竹影随行
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只看该作者 4楼 发表于: 2009-04-09
回 楼主(muru) 的帖子
lz是谁????
我有花就不给你     
离线muru
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只看该作者 5楼 发表于: 2009-04-10
Re:回 楼主(muru) 的帖子
引用第4楼竹影随行于2009-04-09 17:01发表的 回 楼主(muru) 的帖子 :lz是谁????我有花就不给你 [表情]  [表情]  [表情]

那算赏你的
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只看该作者 6楼 发表于: 2009-04-10
这个得顶,我还没写呢,不过我还不能送花,嘿嘿
离线muru
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只看该作者 7楼 发表于: 2009-04-11
回 6楼(失落在冬天) 的帖子
可怜巴巴地期待ing
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