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[探讨]关于外周血DNA提取实验的问题!!! [复制链接]

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离线逝水无痕
 
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只看楼主 倒序阅读 使用道具 0楼 发表于: 2009-11-16
1、DNA样品的纯度与哪些因素有关?
2、从外周血提取DNA尽量用新鲜血,为什么?
3、长期保存DNA样品时其稳定性受哪些因素影响?
请达人指点,谢谢啦。。。
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离线饺子小五
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只看该作者 1楼 发表于: 2009-11-16
额 我也在搜
离线guojun102921
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只看该作者 2楼 发表于: 2009-11-16
纯度与试剂是有关的,还有操作,标本等
新鲜的肯定好啊,细胞完整性好,
冷冻的细胞破碎,DNA容易受损
离线chrome
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只看该作者 3楼 发表于: 2009-11-16
不一定要用很新鲜的血吧
最好是在4度冰箱里静置几天
让血分层
最上面是血浆
最下面是红细胞
中间很薄一层白白的是白细胞层
DNA主要就在这一层里
所以提DNA的时候把血浆吸走
然后摇晃一下试管再吸血
这样DNA浓度比较高
离线逝水无痕
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只看该作者 4楼 发表于: 2009-11-17
谢谢楼上诸位
离线shengzhaoxue
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只看该作者 5楼 发表于: 2011-11-20
1、蛋白 糖类 RNA等
2、陈旧血中,白细胞会不同程度自溶,其中的DNA会降解掉的;其次,细菌容易繁殖,破坏样本,提取率会大大下降。而鲜血中白细胞破裂的少,因此DNA降解的少,提取更加容易。
3、其稳定性受DNA裂解酶、pH值、温度等的影响。因此,长期保存DNA样品时,需要低温-80摄氏度,EDTA,pH值在8.0左右。
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