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小旦 2013-02-02 22:25

有熟悉HE染色的吗?求帮忙

RT,有还在学校里会HE染色的同学吗?LZ需要做HE染色,按丁香园里查的步骤试了两次,染的都不好。真心求帮助,我的手机号是15863191124。

654-2 2013-02-02 22:35
你效果不好指的是什么?核颜色太浅还是浆太红,还是?

wwzhang 2013-02-03 18:17
1冷冻切片
2酒精固定2-3s
3流水冲洗6-7s(把切片插在染色架上,把染色架放在烧杯里,用烧杯接水,不要让水流直接冲在组织上)
4苏木素染色(因为配制方法不同,时间自己摸,我自己配的苏木素染3min)(一般都室温染色,没听说过用60°的。)
5流水洗4-5秒
61%盐酸酒精2-3s
7自来水流水返蓝(因为自来水偏碱性用自来水返蓝就可以)我的返蓝时间1min效果很
80.5%伊红(我用醇溶性的 ,染色时间10s)
9流水稍洗
10 依次过从低到高梯度酒精75%(2-3s)、80%(1min)、90%(1min)、95% (1min) 100%(2min)(我的酒精第一缸是75%在低浓度酒精中不能时间太长,否则会把伊红脱完),二甲苯各一分钟。
11中性树胶封片。

小旦 2013-02-05 10:48
wwzhang:1冷冻切片2酒精固定2-3s3流水冲洗6-7s(把切片插在染色架上,把染色架放在烧杯里,用烧杯接水,不要让水流直接冲在组织上)4苏木素染色(因为配制方法不同,时间自己摸,我自己配的苏木素染3min)(一般都室温染色,没听说过用60°的。)5流水洗4-5秒....... (2013-02-03 18:17) 

冷冻切片是直接贴片的吗?怎样用酒精固定?是下行浓度梯度吗?
中性树胶封片前二甲苯要不要晾干?要先观察一下再封片吗?

wwzhang 2013-03-12 21:03
小旦:冷冻切片是直接贴片的吗?怎样用酒精固定?是下行浓度梯度吗?中性树胶封片前二甲苯要不要晾干?要先观察一下再封片吗? (2013-02-05 10:48) 

是,浸一下95%酒精固定2-3s,不用,晾干再封片二甲苯味会小一点,不用观察了,不封片在镜下看也看不清楚。


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