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[做实验]免疫荧光时遇到的问题 [复制链接]

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离线siberlia
 
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只看楼主 倒序阅读 使用道具 0楼 发表于: 2011-07-14
此帖悬赏结束
最佳答案:1 鲜花,最佳答案获得者:游者狼
fitc标记的荧光二抗(蓝光激发绿光),dapi染得细胞核(紫外激发蓝光),如何才能让荧光亮一些?染得膜蛋白,拍照蓝光激发时细胞核很亮,紫外激发后,换用蓝光激发细胞核就更亮了,这是怎么回事?

如果有好心人能附上你做的步骤那就更加感激不尽了……
[ 此帖被siberlia在2011-07-14 18:43重新编辑 ]
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离线游者狼

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只看该作者 1楼 发表于: 2011-07-17
最佳答案奖励:+1 鲜花
我们做的是先用二抗标记,然后加DAPI,老师让我们先用紫外激发看细胞核,很亮很漂亮,然后不转动视野,再转到绿光激发,观察膜蛋白,这个可能和切片质量有关,如果切得不好的话,视野很模糊,膜蛋白也显示的不清楚。当然,也有可能和二抗没有完全洗干净有关,这个原因也是可能的。
开始的时候先绿光激发,后紫外观察,老师说绿光导致衰变了,观察亮度会受到影响。。。。具体原理还是不太清楚。
离线琴心剑胆
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只看该作者 2楼 发表于: 2011-07-15
热心助人奖励:+1 啄木币
帮顶一个
离线红黄蓝绿
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只看该作者 3楼 发表于: 2011-07-16
热心助人奖励:+1 啄木币
你的问题太高端了,啄木上可能做实验的比较少,你去丁香园之类的吧
离线siberlia
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只看该作者 4楼 发表于: 2011-07-15
悬赏鲜花竟然没有人来回答!
离线琴心剑胆
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只看该作者 5楼 发表于: 2011-07-15
我发现在“科研基地”里回帖得到的啄木币多哎……
离线siberlia
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只看该作者 6楼 发表于: 2011-07-15
回 1楼(琴心剑胆) 的帖子
虽然没有回答问题,但是看在这么热心的份上,把啄木币给你吧~
离线琴心剑胆
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只看该作者 7楼 发表于: 2011-07-15
回 4楼(siberlia) 的帖子
我有点被施舍的感觉
离线siberlia
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只看该作者 8楼 发表于: 2011-07-16
回 5楼(琴心剑胆) 的帖子
是鼓励啊,呵呵
离线siberlia
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只看该作者 9楼 发表于: 2011-07-16
回 5楼(琴心剑胆) 的帖子
是鼓励和感谢啊,呵呵
离线游者狼

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只看该作者 10楼 发表于: 2011-07-17
回 6楼(琴心剑胆) 的帖子
哈哈,太逗了~
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